10.3969/j.issn.1673-4696.2008.06.007
口蹄疫病毒2C'3AB基因重组杆状病毒的构建及其表达
将含有口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白2C部分基因编码区及3AB完整基因编码区的基因片段2C'3AB重组于杆状病毒穿梭质粒pMelBac-B,经PCR、酶切及序列分析鉴定正确后,命名为pMel-2C'3AB.将重组穿梭质粒pMel-2C'3AB与杆状病毒骨架共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选及PCR鉴定,构建了含有目的基因的重组杆状病毒.用该病毒感染High Five细胞,细胞裂解液的SDS-PAGE电泳结果显示,出现一约为43ku的蛋白带,与预期大小一致;Western-blotting结果表明,该表达产物能被FMDV阳性血清及2C'3AB单克隆抗体识别;间接ELISA结果显示,表达的目的蛋白能与牛、羊、猪的O型FMDV阳性血清发生特异性反应.证实,FMDV 2C'3AB基因在昆虫细胞中得到了表达,且表达产物具有良好的反应活性.
口蹄疫病毒、2C 3AB基因、重组杆状病毒、表达
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S852.659.6;Q786(动物医学(兽医学))
国家"十一五"科技支撑计划项目2006BAD06A12;国家重点基础研究发展计划973项目2005CB523201
2008-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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