小亚璃眼蜱4D8基因的克隆与原核表达

摘要：

根据GenBank上登录的边缘革蜱4D8基因序列设计1对引物,采用PCR技术自半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺cDNA表达文库中扩增获得了4D8基因;将其连入pMD18-T载体,构建重组克隆载体pMD18-Hyaa4D8.测序分析表明,克隆的小亚璃眼蜱4D8基因与边缘革蜱4D8基因的核苷酸序列的同源性为89.2%.将此片段定向亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Hyaa4D8,表达并纯化重组蛋白,通过免疫印迹试验鉴定该重组蛋白的生物学活性.结果显示,该重组蛋白是分子质量为45ku的融合蛋白,且表达产物能被半饱血小亚璃眼蜱雌性成蜱唾液腺抗原免疫兔血清识别.

关键词：小亚璃眼蜱、4D8基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：38

分类号：S852.746;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科技资源共享平台项目2005DKA21100;国家高技术研究发展计划863项目2006AA10A207;国家"十一五"科技支撑计划项目2007BAD40B06

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：461-464