猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立

摘要：

根据已发表的PCV-1和PCV-2全基因组序列,设计了3条引物,组成PCV-2的特有引物对和PCV-1、PCV-2的共有引物对,分别扩增长度为472bp和339bp的片段.为验证PCR扩增的特异性,将472bp的扩增产物纯化后,克隆到pMD 18-T载体,转化大肠埃希氏菌TG1,对阳性克隆进行酶切及PCR鉴定,并测序.将该序列递交NCBI进行BLAST同源序列比较,发现它与美国、加拿大及我国台湾的PCV-2毒株核苷酸序列的同源性均在99%以上,与PCV-1毒株的同源性为86%.结果显示,该方法最少可用于3μg病料组织和0.75pg DNA的PCV-2检出,具有很高的灵敏性.应用该PCR方法检测了浙江省和上海市47份"猪高热综合征"病料,PCV-2感染阳性率为36.17%,PCV-1单独感染阳性率为34.04%.

关键词：猪圆环病毒、聚合酶链式反应、流行病学调查

所属期刊栏目：34

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：浙江省重大招标项目J30320

在线出版日期：2004-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：38-41,42