10.3969/j.issn.1673-4696.2003.01.003
轮状病毒VP4基因和VP7基因原核表达载体的构建及表达
经PCR从含有VP4基因、VP7基因片段的重组质粒pT-VP4和pT-VP7中扩增VP4、VP7基因,连接至pGEM-5zf(+).经筛选和鉴定正确后同时酶切目的基因和表达质粒pET-28a(+),连接、转化受体菌,经PCR、酶切和序列分析证明,连接向位和阅读框架是正确的,从而构建了轮状病毒保护性抗原VP4基因、VP7基因片段的原核表达载体pET28a-VP4、pET28a-VP7.重组质粒转化表达菌在IPTG诱导下,用SDS-PAGE、薄层凝胶扫描分析表达的蛋白.结果表明,表达的目的蛋白以包涵体的形式存在,蛋白的分子量分别为37.69和36.20 ku,表达量占菌体总蛋白的比例分别为17.1%和14.4%.
VP4基因、VP7基因、载体构建、原核表达
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S852.659.4(动物医学(兽医学))
2003-10-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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