活性氧介导P62蛋白激活参与甲氨蝶呤耐药绒癌发病机制研究

摘要：

目的 探讨甲氨蝶呤(MTX)耐药绒癌的发生机制.方法 2012年5月至2013年1月于北京协和医院以人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞及本课题组前期构建的MTX耐药绒癌JEG-3/MTXR细胞为研究对象,采用免疫印迹、RT-PCR法检测MTX处理后细胞内P62的变化.流式细胞仪检测MTX诱导后JEG-3/MTXR细胞内活性氧(ROS)变化,采用ROS清除剂MnTmPyP检测MTX作用后JEG-3/MTXR细胞内P62蛋白水平的变化.RNA干扰法沉默P62基因免疫印迹法和流式细胞仪检测MTX诱导后JEG-3/MTXR耐药细胞内PARP蛋白的表达和凋亡率的变化.结果 MTX可诱导耐药绒癌P62蛋白和mRNA表达水平呈时间依赖性上调.MTX可诱导耐药绒癌ROS表达水平升高,MnTmPyP降低P62蛋白的表达.P62-siRNA可促进JEG-3/MTXR细胞内MTX诱导的凋亡反应蛋白PARP的切割和激活,流式细胞仪检测RNA干扰联合药物组细胞凋亡率(14.4±1.02)％,高于单纯药物应用组(9.1±1.34)％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ROS介导P62蛋白激活参与MTX耐药绒癌发生机制,为耐药绒癌临床靶向治疗提供新思路.

关键词：绒癌、耐药、氧化应激反应、P62

所属期刊栏目：30

分类号：R737.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金No.81272890

在线出版日期：2015-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：954-957