重组慢病毒载体建立稳定表达绿色荧光蛋白宫颈癌细胞系
目的 构建含绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组慢病毒,导入宫颈癌细胞系,建立稳定表达GFP细胞系.方法 2007年9月至2010年6月将含GTP基因栽体质粒pGC-FU、包装质粒pHelper 1.0及包膜质粒pHelper 2.0,用磷酸钙共沉淀法共转染包装细胞系293T,收集病毒颗粒感染人宫颈癌Siha细胞,以流式细胞仪筛选出荧光亮度较强GFP阳性的细胞继续培养.结果 利用慢病毒载体可稳定转入GFP基因,获得稳定表达GFP的新宫颈癌细胞系S3,此细胞系中GFP阳性率达99%以上,比较Siha和s3两者生长曲线、细胞周期分布、HPV-16E7的表达量、裸鼠皮下成瘤能力差异均无统计学意义.结论 慢病毒高效转入GFP基因,成功建立了表达GFP的S3细胞系,为宫颈癌基因研究提供了便利.
宫颈癌、绿色荧光蛋白、慢病毒
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R71(妇产科学)
广东省自然科学基金07005147
2010-12-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
833-836