10.13422/j.cnki.syfjx.20232440
解毒通络调肝方干预TGR5/cAMP信号通路靶向NLRP3炎症小体保护胰岛β细胞的作用机制
目的:探讨解毒通络调肝方通过胆汁酸G蛋白偶联受体5(TGR5)/环状磷酸腺苷(cAMP)信号通路靶向NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体保护胰岛β细胞的干预作用.方法:选用32只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、解毒通络调肝方低、高剂量组(3.6、7.2g·kg-1)、二甲双胍组(0.2g·kg-1),8只db/m小鼠作为空白组,药物干预8周,每2周检测各组小鼠空腹血糖(FBG),并在末次给药后,进行口服糖耐量实验(OGTT),酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测空腹胰岛素(FINS)并计算β细胞功能稳态指数(HOMA-β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β水平.苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠胰腺组织病理学改变,免疫荧光测定小鼠胰腺组织胰岛素(Insulin)的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测TGR5/cAMP信号通路和NLRP3炎症小体关键靶点的蛋白、mRNA的表达.结果:与空白组比较,模型组小鼠FBG、OGTT、FINS、IL-6、TNF-α和IL-1β显著升高(P＜0.01);与模型组比较,药物治疗6周后,解毒通络调肝方组和二甲双胍组的FBG水平显著下降(P＜0.01);OGTT实验结果表明,与模型组比较,各给药小组小鼠各时间点的血糖均有降低(P＜0.05,P＜0.01),解毒通络调肝方各剂量组和二甲双胍组FINS、TNF-α和IL-6水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组IL-1β水平显著降低(P＜0.01).胰腺病理显示模型组小鼠的胰岛形状不规则,分布不均匀,有萎缩的征象,解毒通络调肝方干预后,其细胞计数增加,边界更清晰;免疫荧光结果表示,空白组小鼠的胰岛细胞排列有序,形态饱满,伴有适当的胰岛素分泌,而模型组胰岛细胞形态扭曲,结构萎缩,胰岛素分泌变少,解毒通络调肝方各剂量组和二甲双胍组小鼠的胰岛素含量显著增加.与空白组比较,模型组小鼠胰腺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)mRNA表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组促进了 TGR5和cAMP mRNA的上调,并下调了 NLRP3、ASC和Caspase-1的mRNA表达(P＜0.05,P＜0.01).与空白组比较,模型组小鼠TGR5蛋白表达显著降低(P＜0.01);与模型组比较,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组TGR5蛋白显著升高(P＜0.01).与空白组比较,模型组NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达显著增高(P＜0.01);与模型组比较,解毒通络调肝方各剂量组、二甲双胍组Caspase-1、ASC蛋白表达显著降低(P＜0.01),解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组NLRP3蛋白表达显著降低(P＜0.01).与空白组比较,模型组小鼠胰腺组织中cAMP含量显著降低(P＜0.01);与模型组比较,解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组小鼠cAMP含量明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:解毒通络调肝方保护db/db小鼠的胰岛β细胞,其作用机制可能与调节TGR5/cAMP信号通路抑制NLRP3炎症小体有关.
解毒通络调肝方、胰岛β细胞、胆汁酸G蛋白偶联受体5(TGR5)/环状磷酸腺苷(cAMP)信号通路、NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体
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R2-0;R33;R289;R587.1
国家自然科学基金;国家自然科学基金;深圳市科技计划项目;深圳市医疗卫生三名工程项目
2024-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
95-103
