乏氧环境下川芎嗪对肺癌干细胞样细胞血管生成拟态的作用

摘要：

目的:探讨乏氧状态下,川芎嗪(TMP)对非小细胞肺癌A549干细胞样细胞(CSLCs)血管生成拟态(VM)的作用,及TMP对肝细胞生长因子(HGF)/肝细胞生长因子受体(c-Met)蛋白表达的影响.方法:应用无血清成球培养法分离富集A549CSLCs,流式细胞术检测A549CSLCs干细胞标志物CD44+/CD24-/low表达水平,使用CoCl2化学诱导乏氧模型.细胞活性与增殖检测(CCK-8)法检测(100、200、400、800、1 600、3 200 μmol·L-1)TMP对A549 CSLCs细胞活力的作用,选择对A549 CSLCs细胞活力无明显影响的低、中、高浓度(100、200、400 μmol·L-1)进行后续实验.小管形成实验检测不同浓度TMP对乏氧状态A549 CSLCs VM形成的作用,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同浓度TMP对乏氧状态CSLCs HGF/c-Met蛋白表达的影响.结果:流式细胞术检测所分离富集CSLCsCD44+/CD24-/low表达比例为(80.3±0.21)％,与A549组比较显著升高(P＜0.01);CCK-8法显示,与空白组比较,各浓度TMP组CSLCs抑制率不同程度上升,其中24 h TMP组(800、3 200 μmol·L-1);48 h TMP组(1 600、3 200 μmol·L-1)CSLCs抑制率明显升高(P＜0.05);小管形成实验结果显示,与空白组及贝伐珠单抗(Bev)组比较,各浓度TMP组小管结点、交叉点数显著下降(P＜0.01);与SU11274组比较,TMP各组小管结点及交叉点数目减少,TMP组(200 μmol·L-1)小管交叉点数明显减少(P＜0.05);TMP组(400 μmol·L-1)小管结点数及交叉点数显著减少(P＜0.01).Western blot结果显示,与空白组比较,各浓度TMP组HGF、c-Met蛋白水平明显下调(P＜0.05,P＜0.01).结论:TMP能够在体外模型中抑制乏氧状态A549 CSLCs VM形成,可能通过调控HGF/c-Met相关通路发挥作用.

关键词：川芎嗪、肺癌、肿瘤干细胞、血管生成拟态、乏氧

所属期刊栏目：28

分类号：J;R22;R242;R2-031;R285.5

资助基金：国家自然科学基金;北京市自然科学基金

在线出版日期：2022-12-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：64-70