益肾活血方对肾纤维化小鼠血管内皮结构及功能的影响

摘要：

目的:从内皮细胞及细胞能量代谢角度,探讨益肾活血方对肾间质纤维化(RIF)的作用机制.方法:采用单侧输尿管梗阻(UUO)方法造模成功后将75只SPF级C57BL/6小鼠随机分为模型组、白藜芦醇组(50 mg·kg-1·d-1)、益肾活血方低、中、高剂量组(7.1、14.2、28.4g·kg-1·d-1),每组15只.另设15只作为假手术组.假手术组及模型组予等体积生理盐水灌胃.所有小鼠于造模术后第7、14、21天(d7、d114、d121)处死并取材,采用免疫组织化学S-P法检测血小板内皮细胞黏附分子31(CD31)蛋白表达,蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原蛋白(Col-1V)、促血管生成素-1(Ang-l)/酪氨酸激酶受体-2(Tie-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、闭合蛋白(Occludin)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾组织Ang-1/Tie-2、VEGF、VE-cadherin、Occludin mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠活性氧(ROS)水平.结果:与假手术组比较,模型组肾组织中CD31表达明显减少且随造模时间延长而加重(P＜0.05),α-SAM、Col-Ⅳ蛋白表达水平显著升高(P＜0.01);但d14～d21间CD31表达趋于平稳;ROS水平显著升高(P＜0.01);Ang-1/Tie-2、VEGF、VE-cadherin、Occludin蛋白表达及mRNA表达显著下调(P＜0.01).与模型组比较,白藜芦醇组、益肾活血方中、高剂量组治疗后CD31表达量明显增加(P＜0.05),α-SAM、Col-Ⅳ显著下降(P＜0.01),ROS含量显著减少(P＜0.01),Ang-1/Tie-2、VEGF、VE-cadherin、Occludin的蛋白表达及mRNA表达量均显著上调(P＜0.01).与白藜芦醇组比较,益肾活血方低剂量组与益肾活血方中剂量组Ang-l/Tie-2、VEGF、VE-cadherin、Occludin蛋白表达具有显著差异(P＜0.01),益肾活血方高剂量组CD31、Ang-1/Tie-2 mRNA表达量差异无统计学意义,益肾活血方中剂量组ROS水平差异无统计学意义.结论:益肾活血方抗RIF作用可能与促进血管内皮修复、调控线粒体ROS减轻氧化应激,保护肾脏内皮结构完整性,延缓细胞凋亡,维持细胞能量代谢有关.

关键词：益肾活血方、单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠、肾间质纤维化、内皮细胞

所属期刊栏目：28

分类号：R2-0;R22;R285.5;R289;R33

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2022-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：70-77