消癌解毒方含药血清增强NK细胞杀伤结肠癌的作用及机制

摘要：

目的:探讨消癌解毒方含药血清对自然杀伤(NK)细胞杀伤结肠癌细胞的增强作用及分子机制.方法:消癌解毒方含药血清(0.1％、0.5％、1％、5％、10％)处理HCT-116细胞、NK-92MI细胞24h,噻唑蓝(MTT)比色法检测其对细胞增殖的影响.选取低体积分数(0.1％、0.5％、1％)含药血清处理共培养的HCT-116细胞、NK-92MI细胞24h,钙黄绿素-乙酰甲酯/碘化丙啶(Calcein-AM/PI)双染检测NK细胞对结肠癌细胞杀伤作用;流式细胞仪检测结肠癌细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测凋亡、信号传导及转录激活蛋白4(STAT4)通路相关蛋白表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测干扰素(IFN)-γ分泌.结果:MTT比色法显示,与空白组比较,消癌解毒方含药血清(5％、10％)能有效抑制HCT-116、NK-92MI细胞增殖(P＜0.01),但消癌解毒方含药血清(0.1％、0.5％、1％)对细胞增殖无明显影响.与空白组比较,消癌解毒方含药血清(0.1％、0.5％、1％)呈浓度依赖性的增强NK细胞对结肠癌细胞的杀伤活性,并诱导结肠癌细胞凋亡(P＜0.01).Western blot显示,与空白组比较,消癌解毒方含药血清能下调B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关xl蛋白(Bcl-x1)表达,上调Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达(P＜0.05,P＜0.01);与共培养组比较,消癌解毒方含药血清(0.1％、0.5％、1％)能激活p-STAT4磷酸化,促进IFN-γ表达(P＜0.05).ELISA显示,与空白组比较,消癌解毒方含药血清(0.1％、0.5％、1％)能提高IFN-γ分泌量(P＜0.01).结论:消癌解毒方含药血清增强NK细胞杀伤结肠癌细胞活性的机制可能与激活STAT4通路,增加NK细胞IFN-γ分泌量,下调Bcl-x1、Bcl-2表达,上调Bax表达,进而促进结肠癌细胞凋亡相关.

关键词：消癌解毒方、结肠癌、NK细胞、凋亡

所属期刊栏目：28

分类号：R22;R242;R2-031;R285.5(中医基础理论)

资助基金：江苏省自然科学基金;张家港市卫健委青年科技项目;苏州市科教兴卫青年科技项目

在线出版日期：2022-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：85-91