10.13422/j.cnki.syfjx.20202140
柚皮素对Aβ25-35损伤PC12细胞氧化应激及Tau蛋白磷酸化的影响
目的:探讨柚皮素对β淀粉样蛋白(Aβ)25.35损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞氧化应激及Tau蛋白磷酸化的影响及其与雌激素受体(ER)及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3 K/Akt)信号通路的关系.方法:采用Aβ25-35干预PC12细胞制备损伤模型.实验分为空白组、模型组、柚皮素(400,40,4,0.4,0.04,4×10-3,4×10-4,4×10-5 μmol· L-1)组、阳性药雌二醇(E2)(1 nmol·L-1)+Aβ25-35组、柚皮素(0.4,0.04,4×10-3,4×10-4,4×10-5 μmol· L-1)+Aβ25-35组,E2+Aβ25-35+ER拮抗剂(ICI182780)(1 μmo1·L-1)组,柚皮素+Aβ25-35+ICI 182780组,E2+Aβ25-35+PI3K阻断剂(LY294002)(50 μmol·L-1)组、柚皮素+Aβ25-35+LY294002组.噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖率,2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)作为荧光探针检测细胞中总活性氧(ROS)含量,硫代巴比妥酸(TBA)法和氧化酶法分别检测细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中磷酸化Tau蛋白/总Tau蛋白(p-Tau/t-Tau)的表达.结果:根据MTT实验结果,筛选0.4 μmol· L-1为柚皮素最佳有效浓度;与空白组比较,模型组细胞增殖率显著降低(P<0.01),与模型组比较,柚皮素+Aβ25-35组细胞增殖率显著升高(P<0.01).此外,与空白组比较,模型组细胞中ROS,MDA的含量及p-Tau/t-Tau表达显著升高(P<0.01),SOD活性显著降低(P<0.01),与模型组比较,柚皮素+Aβ25-35组细胞中ROS,MDA的含量及p-Tau/t-Tau表达显著降低(P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.01),与柚皮素+Aβ25-35组比较,ICI182780,LY294002的加入显著逆转了柚皮素在上述指标中的作用(P<0.01).柚皮素的作用效果与E2相似.结论:柚皮素可提高细胞增殖率,对Aβ25-35损伤PC12细胞有保护作用,其作用可能是通过激活ER及PI3K/Akt信号通路降低Aβ25-35损伤PC12细胞中ROS,MDA含量及p-Tau/t-Tau表达、促进SOD活性来实现的.
柚皮素、阿尔茨海默病(AD)、β淀粉样蛋白(Aβ)25-35、神经保护作用、雌激素受体(ER)、磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路
26
R2-0;R289;R742
国家自然科学基金;黑龙江省属高校科技成果研发培育项目;黑龙江省大学生创新创业训练计划;黑龙江中医药大学项目;黑龙江中医药大学项目
2020-11-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
92-99