黄芩苷对HT-29细胞炎症模型PI3K/NF-κB信号通路的影响及机制探讨

摘要：

目的:观察黄芩苷对人结肠癌上皮细胞株HT-29的炎症模型中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,并探讨其机制.方法:以肿瘤坏死因子(TNF)-α及脂多糖(LPS)共同诱导HT-29细胞,建立细胞炎症模型.实验分为6组,空白组加入完全培养基孵育,实验过程中不予任何药物干预,模型组给予hTNF(20 μg·L-1)黄芩苷孵育12h后,再给LPS(1 mg·L-1)孵育15 h;柳氮磺胺吡啶组在模型组的基础上,加入柳氮磺胺吡啶(SASP,500 μmol·L-1);黄芩苷组在模型组基础上给予不同剂量(1,10,100 μg·L-1)黄芩苷孵育24 h.噻唑蓝(MTr)法检测黄芩苷(1,10,100 μg·L-1)对细胞生长的影响;免疫印迹(Western blot)法检测黄芩苷(1,10,100 μg· L-1)对PI3K,Akt,NF-κB等蛋白表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测黄芩苷(1,10,100 μg·L-1)对细胞上清中TNF-α,白细胞介素(IL)-6等含量的影响.结果:与模型组比较,黄芩苷组、柳氮磺胺吡啶组的细胞上清液中TNF-α,IL-6,IL-8,IL-1分泌量明显减少(P＜0.05),且两药联合应用对TNF-o,IL-6,IL-8,IL-1分泌量的减弱效应更强(P＜0.01).与模型组比较,黄芩苷组(1,10,100 μg·L-1),柳氮磺胺吡啶组(500 μmol·L-1)中的PI3K蛋白磷酸化水平,Akt磷酸化水平,NF-κB活化入核水平,环氧化酶-2(Cox-2)蛋白,β-连环蛋白(β-catenin)蛋白,天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)蛋白,人凋亡相关因子配体(FasL)蛋白表达均明显减少(P＜0.05).结论:黄芩苷能减轻HT-29细胞炎症反应,抑制PI3K磷酸化,下调Akt的活化,抑制NF-κB的活化入核,从而抑制TNF-α,IL-6等炎症因子的分泌,发挥其抗炎效应,提示黄芩苷可能通过以抑制Akt的活化,抑制NF-κB的核转位,发挥其抗炎作用.

关键词：黄芩苷、炎症、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶、核转录因子-κB

所属期刊栏目：22

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;中医药行业科研专项;江苏省临床医学科技专项

在线出版日期：2016-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：118-122