人干扰素α2b原液中三氟乙酸残留量反相高效液相色谱检测方法的建立及验证

摘要：

目的 建立反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)法测定人干扰素α2b(human interferon alpha 2b,hIFNα2b)原液中三氟乙酸(trifluoroacetic acid,TFA)的残留量,并进行验证及初步应用.方法 液相色谱条件为:ZORBAX 300SB-C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm);流动相0.08％磷酸(pH 3.0)+5.0％甲醇溶液;检测时间6 min;流速0.8mL/min;柱温35 ℃;紫外检测器波长210 nm;上样量20μL;等度洗脱.对方法进行系统适应性、线性、专属性、准确性、精密性、定量限与检测限及耐用性验证.同时采用建立的方法和复合型色谱柱Comixsil ACRP(100 mm × 4.6 mm,5 μm)测定3批hIFNα2b原液样品的TFA残留量.结果 TFA在10～300 μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.998 4);平均加标回收率为101.8％,RSD为2.68％;重复性和中间精密度验证的RSD分别为0.46％和0.45％;定量限为10μg/mL,检测限为2 µg/mL;有机溶剂、缓冲盐pH与柱温箱温度在规定条件下轻微上下浮动对检测结果无明显影响,检测波长变化时峰面积会受到影响.采用2种方法检测3批hIFNα2b原液中TFA残留量,结果均未检出.结论 建立的RP-HPLC法具有较好的系统适应性、专属性、准确性、精密性及耐用性,可用于hIFNα2b原液中TFA残留量的测定.

关键词：反相高效液相色谱法、人干扰素α2b、三氟乙酸残留量

所属期刊栏目：37

分类号：R297.2(中国少数民族医学)

资助基金：吉林省科技发展计划项目20160307028YY

在线出版日期：2024-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：996-1001