白喉产毒培养基中铁离子磺基水杨酸分光光度检测方法的建立及验证
目的 建立测定白喉产毒培养基中微量铁离子的磺基水杨酸分光光度法,并进行验证及初步应用.方法 全光谱扫描铁-磺基水杨酸络合物最大吸光度;以铁磺基水杨酸络合物吸光度与铁离子含量进行线性回归,建立培养基中铁离子检测方法,并对方法进行稳定性、准确性和精密性验证;考察Ca2+、Mg2+、K+、Na+以及显色反应物对方法的影响;采用磺基水杨酸分光光度法测定自制及市售白喉产毒培养基中微量铁离子;分别采用磺基水杨酸分光度法及常用方法亚铁嗪比色法、邻菲啰啉分光光度法检测两种培养基(牛肉胰酶消化液、5%多聚蛋白胨)中铁含量,比较3种方法的检测结果.结果 铁-磺基水杨酸络合物在波长425nm处有最大吸光度;铁离子浓度在1~0.05μg/mL范围内与吸光度存在良好的线性关系,检测限为0.05 μg/mL,标准曲线方程为:Y=0.027 9 X+0.046 1,R2>0.99;每间隔5 min测定1次A425值,各浓度标准品A425值的变异系数(CV)均小于5%;低(0.05 μg/mL)、中(0.5 μg/mL)、高浓度(1 μg/mL)Fe3+标准品溶液连续测定3次,每个浓度平行测定9组的CV均<5%,回收率均>95%;Ca2+、Mg2+、K+、Na+、15 μL磺基水杨酸(20%)和50 μL氢氧化氨(1∶1)不对检测方法构成干扰;产毒培养基测定结果与白喉细菌产毒结果一致;3种检测方法结果一致.结论 建立的磺基水杨酸分光光度法能够准确、有效地测定白喉产毒培养基中微量铁离子含量.
白喉、白喉毒素、铁离子、磺基水杨酸、分光光度法
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R331(人体生理学)
云南省科技厅科技计划;昆明市科技局重点项目
2023-11-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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