sIPV疫苗D抗原含量双抗体夹心ELISA检测方法的建立及验证

摘要：

目的 建立牛多抗对兔多抗夹心ELISA方法检测Sabin株脊灰病毒灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus vaccine,sIPV)D抗原含量,并对建立的方法进行验证.方法 分别采用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sIPV疫苗原液作为抗原制备兔多抗,并通过间接ELISA法检测其效价及特异性.以牛多抗为包被抗体、兔多抗为显示抗体建立检测D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,并对方法的准确度、精密度及D抗原专属性进行验证.用建立的方法检测国内5家企业sIPV疫苗样品.结果 制备获得型别特异性好、效价高的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型兔多抗,并成功建立了双抗体夹心ELISA方法.采用四参数拟合,3型别标准曲线均具有良好的线性关系,R2均＞0.99.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型各试验加标回收率均为80％～120％,各浓度平均回收率分别为98.11％、97.41％、98.66％;重复性与中间精密度CV均＜10％;能够对D/C抗原进行区分.建立的方法对5家企业生产的sIPV疫苗均能够进行D抗原定量检测.结论 成功建立了检测sIPV疫苗D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,该方法准确度、精密度良好,具有一定的D抗原特异性,能够对不同厂家生产的疫苗进行检测.

关键词：Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗、D抗原、酶联免疫吸附试验、抗体

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分类号：R183.3;R392-3(流行病学与防疫)

资助基金：国家科技重大专项;国家科技重大专项;北京市自然科学基金

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1230-1234,1241