不同稀释液对混合酶标抗体稳定性的影响
目的 探讨不同稀释液对混合酶标抗体稳定性的影响,筛选出一种适用于混合酶标抗体的稀释液,可同时保护辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)偶联二抗和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)偶联二抗鸡尾酒混合物的稳定性.方法 以Tris-HCl缓冲盐溶液为基础溶液,设置4种不同的稀释液配方(A、B、C、D),每种配方包含不同类型的稳定剂,如蛋白、金属离子、表面活性剂、抑菌剂等,采用不同的稀释液配置混合酶标抗体,在冷藏(2～8 ℃)和37 ℃条件下存储,通过ELISA、酶活测定及免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色法检测其稳定性.结果 D液配方[Tris(50mmol/L)+牛血清白蛋白(1.5％,g/100mL)+Tween-20(0.3％)+Proclin-950(0.1％,g/100 mL)+氯化钠(150 mmol/L)+L-Ascorbic Acid(1 mmol/L)+L-methionine(5 mmol/L)+L-histidine(5mmol/L)+酪蛋白酸钠(1％,g/100 mL)+氯化锌(0.1 mmol/L)+海藻糖(8％,g/100 mL)]保存试剂的稳定性最好,在37 ℃条件下保存10周,HRP偶联二抗和AP偶联二抗的工作液效价最高,HRP和AP的活性剩余比率分别为93.46％和96.07％,IHC结果无明显差异.结论 该配方稀释液可用于混合酶标抗体工作液的配置.
稀释液、混合酶标抗体、稳定性、稳定剂、免疫组织化学
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Q2-33
河南省重大科技专项;郑州市重大科技创新专项;郑州市重大科技创新专项
2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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