外膜蛋白C作为蛋白呈递平台将抗原定位至细菌外膜囊泡表面的可行性

摘要：

目的 探讨外膜蛋白C(outer membrane protein C,OmpC)作为蛋白呈递平台将抗原定位至细菌外膜囊泡(outer membrane vesicle,OMV)表面的可行性.方法 构建含有ompC基因片段及金黄色葡萄球菌EsxA抗原基因(esxA基因)的重组表达质粒,转化感受态E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物进行12％SDS-PAGE分析.提取重组菌OMV,经12％SDS-PAGE分析OMV总蛋白,并采用Westernblot法和纳米流式仪检测融合蛋白定位至OMV表面的情况.结果 含ompC基因和esxA基因的重组表达质粒经测序证明构建正确.融合蛋白OmpC-EsxA经12％SDS-PAGE分析,可见相对分子质量约57 000的目的蛋白条带,大小与预期相符.OMV总蛋白经12％SDS-PAGE分析,可见多条蛋白条带,表明成功提取重组菌OMV.重组菌OMV表面的融合蛋白OmpC-EsxA可与小鼠抗His-Tag抗体发生特异性结合,且纳米流式仪可检测到荧光抗体标记的OMV.结论 OmpC可作为蛋白呈递平台将抗原定位至OMV表面,有望应用于抗原呈递疫苗的研发.

关键词：外膜蛋白C、蛋白呈递、细菌外膜囊泡

所属期刊栏目：36

分类号：Q939.99(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金;深圳市科技计划

在线出版日期：2023-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：39-42,47