精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列修饰对流感病毒溶瘤能力的影响

摘要：

目的 探讨精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列修饰对流感病毒溶瘤能力的影响.方法 采用流感病毒反向遗传操作体系,将含PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS的质粒PHW200(八质粒)及经RGD修饰的八质粒分别共转染293T细胞,拯救出野生型和重组RGD流感病毒.采用胶体金法试纸条进行鉴定,血凝试验检测病毒效价,PCR法检测病毒传代稳定性,噬斑试验检测病毒滴度.用拯救的两种流感病毒感染不同细胞(B16-F10、A549、TC-1、CT26、4T1和Vero细胞),检测细胞活力和细胞中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率.用B16-F10细胞注射小鼠,建立小鼠黑色素瘤模型后,分别注射两种流感病毒及PBS,隔1 d给药1次,共5次,肿瘤细胞接种后19 d,测量肿瘤大小;肿瘤细胞接种后25 d,统计小鼠存活数量.结果 野生型和重组RGD流感病毒经胶体金法试纸条鉴定均为阳性,血凝效价分别为1 ∶ 28和1 ∶ 29,传代稳定性良好,病毒滴度分别为3×107和1.8×107 PFU/mL.两种流感病毒感染后B16-F10和A549细胞活力均大幅降低,其他细胞活力变化较小;与相应野生型流感病毒组比较,重组RGD流感病毒组B16-F10细胞中LDH释放率明显升高(P＜0.05),A549细胞略升高,但差异无统计学意义(P＞0.05),其他细胞均较低.与PBS组比较,两种流感病毒组小鼠肿瘤大小明显减小(P＜0.001),小鼠存活率明显升高(P＜0.05).结论 RGD修饰的流感病毒对B16-F10具有较好的亲嗜性,且溶瘤能力增强.本研究为溶瘤流感病毒在肿瘤治疗中的应用奠定了基础.

关键词：流感病毒、溶瘤能力、精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列、黑色素瘤

所属期刊栏目：35

分类号：R392-33

资助基金：云南省创新疫苗技术与产业转化研发平台106001016-14

在线出版日期：2022-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：551-556,561