4型流感病毒疫苗株在MDCK细胞中增殖条件的优化

摘要：

目的 优化4型流感病毒疫苗株H1N1(IVR-215)、H3N2(NIB-121)、BV(BVR-11)、BY(BVR-1B)在稳定表达牛胰蛋白酶原的MDCK细胞(MTY6)和MDCK细胞中的增殖条件,并比较MTY6和MDCK细胞培养不同型别流感病毒的差异.方法 以血凝滴度和病毒滴度[半数组织感染剂量(median tissue culture infective dose,TCID50)]为指标,通过棋盘法对4型流感病毒疫苗株在MTY6和MDCK细胞上种毒的MOI(10-1、10-2、10-2、10-4)、胰酶终浓度(0.5、1、1.5、2μg/mL)及收毒时间(0、24、48、72、96 h)进行优化;以接毒后细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)为指标,分析两种细胞对不同型别流感病毒的敏感性.结果 H1N1、H3N2、BV和BY株病毒在MTY6细胞中培养的最适MOI分别为10-4、10-4、10-2、10-2,胰酶终浓度分别为0.5、1、0.5、0.5 μg/mL,收毒时间分别为96、72、48、72 h.H1N1、H3N2、BV和BY株病毒在MDCK细胞中培养的最适MOI均为10-4,胰酶浓度为0.5、1、0.5和1.5 μg/mL,收毒时间为96、48、72和72 h.4型流感病毒疫苗株在MTY6细胞中培养比在MDCK细胞中具有更高的血凝滴度和TCID50.在相同时间内,H1N1、H3N2、BY株病毒在MTY6细胞中比在MDCK细胞中能够引起更明显的CPE.结论 成功优化了4型流感病毒疫苗株在MTY6细胞中的增殖条件,MTY6细胞与MDCK细胞相比,培养4型流感病毒疫苗株能够获得更高的病毒滴度,并增加病毒产量.本研究为MTY6细胞用于流感疫苗生产奠定了基础.

关键词：流感病毒;MDCK细胞;胰酶;增殖

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分类号：R373.1+3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金："重大新药创制"科技重大专项2016ZX09106003-008

在线出版日期：2021-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1151-1156