响应面法优化检测己二酸二肼衍化后破伤风类毒素纯度的排阻型高效液相法

摘要：

目的 响应面法优化检测己二酸二肼(adipate hydrazine,ADH)衍化后破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)纯度的排阻型高效液相(SEC-HPLC)法.方法 SEC-HPLC层析柱Superdex 200 increase 3.2/300流动相为:20 mmol/LNa2CO3/NaHCO3,150 mmol/L NaCl,pH9.0,柱温25℃,单针检测时间60 min.采用响应面法及中心复合表面设计模型(Central Composite Face-centred,CCF)对层析柱的流速、进样量、样品浓度进行优化,通过分离度、峰对称性、峰理论塔板数、单针进样时间等评价指标,确定最优色谱参数,并在最优色谱参数下连续进样100针,验证其分离效果.结果 色谱柱的最优色谱条件为:流速50μl/min,进样量5μl,样品浓度1.Omg/ml,连续进样100针各响应量均满足优化目标.结论 成功采用响应面法优化了检测ADH衍化后TT纯度的SEC-HPLC法,且优化后的方法具有良好的稳定性.

关键词：响应面法、己二酸二肼、破伤风类毒素、纯度、排阻型高效液相法

所属期刊栏目：29

分类号：R392-33;O657.7+2

在线出版日期：2016-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1094-1098,1103