测定唾液酸含量的改良间苯二酚-盐酸法的建立及验证

摘要：

目的 建立测定脑膜炎球菌多糖、多糖衍生物及结合物中唾液酸含量的改良间苯二酚-盐酸法,并进行验证.方法 以《中国药典》三部(2015版)测定多糖中唾液酸含量的间苯二酚-盐酸法为基础进行改良,去除有机相萃取步骤,优化方法中的检测波长(300～900 nm)及煮沸时间(10、15、20、25、30、35和40 rin);并对建立方法的线性范围、中间精密度及准确度进行验证.比较改良法与《中国药典》法对样品唾液酸含量及其层析分部产物;液酸含量测定结果的差异,同时检测乳糖对改良法测定唾液酸含量的影响.结果 方法中最佳检测波长为569 nm,最佳煮沸时间为30 rin.唾液酸对照品浓度在5～40 μg/ml范围内与569 nm吸收值呈良好的线性关系,R2均＞0.999;3位实验人员在3个不同时间对样品中唾液酸含量测定9次结果的CV均＜3％;外加5、10、20 μg/ml浓度的N-乙酰神经氨酸的回收率均在95％～105％之间.改良法与《中国药典》法检测的样品唾液酸含量差异无统计学意义(P＞0.05),且两种方法的层析分部图谱一致.乳糖溶液浓度超过100 μg/ml时对唾液酸测定结果的干扰较大.结论 本实验建立的改良唾液酸测定法具有良好的线性、精密度和准确度,可用于脑膜炎球菌多糖、多糖衍生物和结合物唾液酸含量的测定.

关键词：间苯二酚-盐酸法、唾液酸含量

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分类号：O656.33(分析化学)

资助基金：甘肃省科技重大专项0801NKDA003;甘肃省“十二五陇药产业发展”专项.

在线出版日期：2016-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1087-1093