不同工艺制备的E型肉毒毒素及其类毒素的免疫原性分析

摘要：

目的 用不同工艺制备E型肉毒毒素,脱毒制备类毒素,并分析其免疫原性.方法 分别用菌体内提取法和酸沉淀法制备E型肉毒毒素,进行毒素型特异性检定及毒力测定后,脱毒制备类毒素,参考《中国药典》三部(2010版)进行结合价、蛋白氮(PN)含量、总氮(TN)含量、pH测定及脱毒检查和毒性逆转试验.选择结合价较高的2批类毒素配制3组抗原,经家兔皮下进行基础免疫(共2针)和3程超免疫(2针/程),每针间隔14d,每程免疫间隔30 d,均于第2针免疫后第20天,经耳缘静脉采血,分离血清,参考《中国药典》三部(2010版)附录ⅪH肉毒抗毒素效价检测法,检测抗体效价.结果 55、120 h菌体内提取毒素(201112001和201112003批)及55、120 h酸沉淀提取毒素(201112002和201112004批)均为E型肉毒毒素,毒力分别为6.2× 103、5.0× 102、4.5×102、6.5×103 LD50/ml;各组类毒素脱毒检查和毒性逆转试验结果均符合《中国药典》三部(2010版)规定,55 h酸沉淀提取毒素其类毒素TN、PN含量最高,120 h菌体内提取毒素最低.制备的3组抗原(201112001-1、201112004-1及201112004-2批)抗原结合价分别为900、2 100和900 BU/ml;两种方法制备的类毒素按最高结合价配制抗原,免疫后的血清效价差异无统计学意义(P＞0.05),两种方法制备的类毒素按相同结合价配制抗原及同批类毒素配制的不同结合价抗原,免疫后的血清效价差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 用酸沉淀法从120 h培养液中提取毒素可获得与55 h菌体内提取毒素相同免疫原性的类毒素.酸沉淀法操作简便,更适宜马匹免疫用E型肉毒抗原的规模化生产.

关键词：E型肉毒毒素、菌体提取、酸沉淀、类毒素、免疫原性

所属期刊栏目：27

分类号：R378.8+3;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2015-03-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1607-1609,1614