流感病毒RNA在RNA抽提试剂裂解缓冲液中的稳定性
目的 评价RNA抽提试剂的裂解缓冲液(lysis buffer,LB)对流感病毒(influenza virus,FIu-V)RNA的稳定作用.方法 将流感病毒临床分离株A/Zhongshan/085/2009(H 1N1)进行102稀释,加入RNA抽提试剂的LB后,分别置4和-20℃保存7、15、30和45 d,以未经LB处理的Flu-V稀释物作为对照.提取各样品核酸后,分别采用实时RT-PCR(靶序列长105 bp)和普通RT-PCR(扩增子长527 bp)进行检测.结果 经LB处理的样品,在4和-20℃保存45 d,均能检测到特异性扩增信号;在4℃保存30 d,-20℃保存45 d,均可用于较长核酸片段的扩增分析.而未经LB处理的样品,在-20 c℃也可稳定45 d,用于该两种RT-PCR的检测,但在4℃仅7d时能检测到527 bp的靶序列,30 d时,两种RT-PCR方法均未检测到靶序列.结论 LB可延缓流感病毒RNA的降解,具有用作流感病毒核酸检测样品稳定剂的潜能.
流感病毒、核糖核酸、稳定性
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R373.1+3(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
中山市卫生局医学科研立项课题J2011107;国家科技重大专项2012ZX10004213资助.
2014-12-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1272-1274