简化法与传统方法进行淋巴细胞胞内细胞因子染色效果的比较

摘要：

目的:分别采用简化法与传统方法进行淋巴细胞胞内细胞因子染色,通过流式细胞术检测比较两种方法的染色效果.方法:取健康志愿者外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),分别经佛波酯(Phorbol myristate acetate,PMA)、离子霉素( Ionomycint,Ion)和莫能霉素(Monensin)刺激4h,分别以传统法(细胞刺激后进行表面染色,再固定,破膜,行细胞内染色)和简化法(细胞刺激后直接固定、破膜,在不同时间段进行膜上膜内同时染色)进行细胞内染色.样本经抗体标记后,采用流式细胞术检测淋巴细胞的百分率.结果:简化法染色检测Th1细胞的百分比与传统染色方法相比,差异无统计学意义(P＞0.05)；而简化法染色检测Th17细胞的百分比明显高于传统方法(P＜0.05).与传统法比较,应用简化法,细胞于破膜后固定0、48、96 h染色,检测Th2细胞的百分比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:简化法简化了操作流程,有利于流式细胞术的质控,可替代传统染色方法进行淋巴细胞胞内细胞因子染色.

关键词：流式细胞术、细胞内染色、Th1细胞、Th2细胞、Th17细胞

所属期刊栏目：25

分类号：R392-33;Q2-33

资助基金：重庆市医学重点研究室建设项目2007-14;重庆市卫生局科研项目2009-2-050

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：633-637