Runx3-shRNA表达载体的构建及其干扰作用的检测

摘要：

目的:构建Runx3基因shRNA重组表达质粒,并检测其干扰作用.方法:人工合成靶向Runx3基因的shRNA序列,克隆至pGenesil-1.1表达载体上,构建重组表达质粒Runx3-shRNA,转染人耐药肝癌HepG2细胞；采用半定量RT-PCR及Western blot法检测重组表达质粒对HepC2细胞中Runx3基因的转录和表达水平的影响.结果:重组表达质粒Runx3-shRNA经酶切及测序证明构建正确；其转染人耐药肝癌HepG2细胞后,细胞Runx3基因的转录和蛋白表达水平均明显降低,与空白对照组和阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:已成功构建了Runx3-shRNA表达质粒,为进一步研究Runx3基因在肿瘤耐药细胞中的作用奠定了基础.

关键词：Runx3基因、RNA干扰、抗药性、肿瘤

所属期刊栏目：25

分类号：Q782;R392-332(基因工程（遗传工程）)

资助基金：重庆市自然科学基金计划项目CSTC;2010BA5011;重庆市教育委员会科学技术研究项目0200050174KJ090303

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：579-583