免疫抗体文库的构建及亚nM高亲和力人源抗体的筛选

摘要：

目的 构建免疫抗体文库,并筛选亚nM高亲和力人源抗体.方法 采用破伤风类毒素(Tetanus toxoid,TT)免疫的高效价人B淋巴细胞,经PCR扩增可变区基因,构建免疫抗体文库,并筛选高亲和力人源抗体.将获得的抗体基因片段转换成全分子,进行真核表达和纯化,并与人抗TT多克隆抗体进行比较分析.结果 构建的人破伤风免疫噬菌体抗体库库容为4.5×106,多样性符合引物设计要求,经筛选获得相对亲和力为10-10 M的高亲和力人源抗体,其体内中和活性高于人多克隆抗体.结论 根据抗体基因使用频率设计引物构建小容量免疫抗体文库,可获得亚nM的高亲和力人源抗体,该策略可用于抗感染性疾病人源抗体的开发.

关键词：噬菌体文库、人源抗体、抗体亲和力、中和活性、破伤风毒素

所属期刊栏目：23

分类号：Q789;R392-33(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2011-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1286-1290