重组人B7-H1IgV发酵纯化工艺的建立及其抑瘤活性

摘要：

目的 建立大规模生产重组人B7-H1IgV(rhB7-H1IgV)的发酵和纯化工艺,并检测纯化蛋白的抑瘤活性.方法 对rhB7-H1IgV工程菌进行发酵培养,IPTG诱导表达,采用超声裂菌分离包涵体,梯度复性,2次Ni亲和层析等步骤纯化目的 蛋白,并进行SDS-PAGE、Western blot分析及抑瘤活性检测.结果 在建立的发酵工艺下,rhB7-H1IgV的表达量可达菌体总蛋白的(10～11)%;纯化的rhB7-H1IgV蛋白经HPLC检测,纯度可达95%以上,Western blot检测具有良好的反应原性;动物实验表明纯化的重组蛋白能诱导BALB/c小鼠产生高滴度的抗B7-H1抗体,且对肿瘤的生长具有明显的抑制作用.结论 所建立的rhB7-H1IgV发酵纯化工艺简单迅速,为其开发和应用奠定了基础.

关键词：B7-H1、发酵、纯化、抑瘤活性

所属期刊栏目：23

分类号：Q789;R730.51(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家"新药创制"科技重大专项资助项目2009ZX-09103-670

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：594-597