霍乱毒素B亚单位植物细胞表达载体的构建及其在人参细胞中的表达
目的 构建霍乱毒素B亚单位(CTB)植物细胞表达载体,并在人参细胞中进行表达.方法 根据人参偏爱密码子,采用引物延伸PCR法合成CTB基因,连入pBI121质粒,构建植物细胞表达载体,转化人参细胞后.采用PCR、RT-PCR和Western blot进行鉴定.结果 测序结果表明,PCR法合成的目的基因序列与设计完全一致,构建的植物细胞表达载体经双酶切鉴定显示,所含基因片段大小与预期相符.提取转基因人参细胞基因组DNA和mRNA,分别进行PCR和RT-PCR鉴定,均可见约400 bp的特异性片段.Western blot分析可见相对分子质量约12 000的特异性条带.结论 已成功构建了含霍乱毒素B亚单位的植物细胞表达载体,并在人参细胞中获得表达.
霍乱毒素B亚单位(CTB)、植物细胞表达载体、人参细胞、转基因
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Q786(基因工程(遗传工程))
2009-08-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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