10.3969/j.issn.1004-5503.2004.06.005
大鼠Endostatin在乳酸乳球菌中的克隆与表达
目的在乳酸乳球菌中克隆与表达大鼠endostatin.方法采用RNA分离试剂盒从大鼠肾脏组织中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增其endostatin基因,将该基因克隆进pUC19质粒中,转化大肠杆菌DH5a,提取质粒,分离基因,酶切后与含有乳酸乳球菌启动子nisin的pLA141质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的GM17培养基上培养.用nisin诱导endostatin表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物.结果表达产物相对分子质量约为14 000,表达量约为10mg/L.结论在乳酸乳球菌中可以表达出正确的大鼠endostatin重组蛋白,为下一步进行重组蛋白的活性检测以及临床实验提供了依据.
乳酸乳球菌、Endostatin、克隆、表达
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Q352
2004-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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