幽门螺杆菌鞭毛蛋白B亚单位原核表达系统的构建及其产物的免疫性

摘要：

目的构建幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)鞭毛蛋白B亚单位(flaB)原核表达系统,并鉴定其表达产物的免疫性.方法采用PCR从幽门螺杆菌基因组DNA中扩增全长flaB基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET32a-flaB表达载体,以E.coliBL21DE3为表达宿主菌,用SDS-PAGE检测重组蛋白(rFlaB)的表达水平.采用Hp全菌抗体的Westem blot和兔抗rFlaB血清的免疫扩散试验鉴定其免疫反应性和抗原性.结果所克隆的flaB基因与文献报道的核苷酸序列同源性为96.31%～97.73%,氨基酸序列同源性高达99.41%～100%.构建的原核表达系统pET32a-flaB-E.coliBL21DE3的rFlaB产量为细菌总蛋白的40%左右.Hp全菌抗体能识别rFlaB.rFlaB免疫家兔能获得高效价血清抗体.结论已成功地构建了Hp flaB高效原核表达系统,所表达的rFlaB有良好的免疫反应性和抗原性,可作为Hp疫苗的候选抗原.

关键词：幽门螺杆菌、flaB基因、表达载体、免疫学效果

所属期刊栏目：17

分类号：Q93(微生物学)

资助基金：教育部优秀青年教师资助计划;浙江省科技计划

在线出版日期：2004-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：193-195,213