双重荧光定量PCR检测沙门菌和单核细胞增生李斯特菌方法的建立

摘要：

目的 建立双重荧光定量PCR方法,快速检测沙门菌和单核细胞增生李斯特菌.方法 通过设计特异性引物和探针,扩增沙门菌的fimY基因和单核细胞增生李斯特菌的hly基因,采用倍比梯度稀释法检测该体系的灵敏度,以另外7株肠道致病菌评价检测体系的特异性;建立了沙门菌和单核细胞增生李斯特菌感染小鼠的检测模型以验证方法的适用性.结果 建立了同时检测沙门菌和单核细胞增生李斯特菌的双重荧光定量PCR方法,从DNA提取到检测完毕仅需2.5 h.检测两种病原菌的灵敏度分别为11和12.8 copies/μl,特异性为100%,符合率为93.3%.结论 该法缩短了检测时间,并有良好的灵敏性和特异性,在疾病防控及食品卫生行业中很有应用前景.

关键词：沙门菌、单核细胞增生李斯特菌、双重荧光定量PCR

所属期刊栏目：23

分类号：R378.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：质检公益性行业科研专项2007GYJ025;2007GYJ023

在线出版日期：2011-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：289-292