不同热处理方法对鲤鱼DNA的影响及不同DNA提取方法的比较

摘要：

目的 研究不同加热方法处理后鲤鱼基因组DNA长度和含量的变化,并对4种DNA提取方法进行比较.方法 用电磁炉和微波炉将鲤鱼背部肌肉加热煮沸1、2、3 h取出,再分别用酚氯仿法、Wizard 试剂盒法、磁珠法和离心柱法提取处理前后鲤鱼基因组DNA,利用琼脂糖凝胶电泳对处理前后的总DNA长度进行比较,再用实时荧光定量PCR法检测所得DNA样品中内参基因口β-actin含量的变化.结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示,处理后DNA片段明显降解.生鱼肉提取β-actin的量为1 070 213.39拷贝/μl,电磁炉处理1、2、3 h的浓度分别为143 309.6、441 350.43和256 994.16拷贝/μl,微波炉处理1、2、3 h的浓度分别为269 121.17、267 371.16和134649.97拷贝/μl.酚氯仿法、Wizard 试剂盒法、离心柱法和磁珠法提取的平均DNA浓度分别为718 944.93、737 945.64、26 751.22和2 934.06拷贝/μl.结论 加热煮沸导致DNA降解,因此加工食品中DNA的检测应当选择较短的目标片段.4种DNA提取方法比较,Wizard 试剂盒法和酚氯仿法提取的DNA浓度显著高于离心柱法和磁珠法,且离心柱法又高于磁珠法.

关键词：加热时间、鲤鱼DNA、DNA提取方法、荧光定量聚合酶链反应

所属期刊栏目：23

分类号：Q812;S917(生物工程学(生物技术))

资助基金：％％2008ZX08012-005

在线出版日期：2011-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：245-248