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10.7522/j.issn.1000-694X.2017.00031

东方百合(Lilium)杂交品种索邦病程相关蛋白(PR1)基因的克隆与原核表达

引用
病程相关蛋白(PR)广泛参与植物对生物和非生物胁迫的应答.采用cDNA末端快速克隆技术,从东方百合(Lilium)杂交品种索邦中克隆了PR1基因,并命名为LhSorPR1.LhSorPR1基因cDNA全长870 bp,5'非翻译区和3'非翻译区的长度分别为47 bp和274 bp.该基因的开放阅读框为549 bp,编码182个氨基酸.成熟的LhSorPR1蛋白(不含信号肽)分子量为18.19 kDa,等电点为5.69.采用同源建模方式构建的LhSorPR1蛋白三维结构与其模板番茄PR1蛋白p14a具有较高的相似性,说明百合PR1蛋白在结构和功能上与其他植物中的PR1蛋白具有较强的保守性.构建pCold Ⅱ-LhSorPR1原核表达,经IPTG诱导后,目的蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式成功表达.使用免疫印迹方法对表达的LhSorPR1重组蛋白进行了验证,并对带有His标签的重组蛋白成功进行了纯化.

百合(Lilium)、抗病性、病程相关蛋白、同源建模、原核表达

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Q943(植物学)

国家自然科学基金项目31101190;宁夏农业综合开发科技推广项目NTKJ2015-05-01;中国科学院“百人计划”项目Y629721002;中国科学院关键技术人才项目2016-65;中国博士后科学基金项目2015M580894;2014年中国科学院“西部之光”重点项目

2018-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共8页

584-591

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中国沙漠

1000-694X

62-1070/P

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2018,38(3)

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