草鱼TBK1基因荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)基因在天然抗菌免疫中发挥重要作用,为研究该基因在草鱼(Ctenopharyngodon idella)抗病天然免疫中的表达水平,本研究根据已报道的草鱼TBK1基因(ciTBK1)序列,设计特异性引物2对,基于ciTBK1和18S rRNA双标准曲线建立了荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测方法.结果表明,建立的标准曲线Ct(Cycle thrshold)值与模板浓度的对数呈现良好的线性关系(R2均大于0.99),建立的qRT-PCR检测方法能特异地定量检测ciTBK1基因,检测灵敏度可达50拷贝/μL,且组内及组间变异系数均小于5％.所建立的qRT-PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性.

关键词：草鱼、TBK1基因、18S rRNA基因、荧光定量PCR、双标准曲线

所属期刊栏目：12

分类号：S917(水产基础科学)

资助基金：现代农业产业技术体系;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项

在线出版日期：2023-02-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：9-14