10.3969/j.issn.1002-2694.2023.00.101
白念珠菌HGT19基因敲除株的构建与基因功能初步研究
目的 构建白念珠菌HGT19基因敲除株,并进行初步的基因功能研究.方法 利用同源重组的原理,采用LEU2、HIS1和ARG4营养筛选策略,选用乙酸锂法转化白念珠菌,同时替换白念珠菌原基因组的两条链,得到HGT19敲除菌(HGT19Δ/Δ).利用敲除菌与野生型对照开展一系列表型研究,初步探索HGT19在白念珠菌中的功能.结果 经过PCR和营养型鉴定,成功获得HGT19敲除株.点板实验表明HGT19Δ/Δ与野生型相比,HGT19Δ/Δ对Zn2+与细胞膜损伤剂SDS(十二烷基硫酸钠)敏感,对其他大部分金属离子(Na+、K+、Li+、Ca2+、Fe2+.Fe3+、Cu2+)无明显差异.生物膜实验表明HGT19Δ/Δ生物膜与野生型相比有缺陷.小鼠的生存实验表明,HGT19Δ/Δ组与野生型组相比,可减缓小鼠的死亡.结论 敲除HGT19基因后,白念珠菌对锌离子敏感,形成生物膜能力明显减弱,毒力明显减弱.
白念珠菌、基因敲除、生物被膜、锌离子、毒力
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R379.4(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2023-11-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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