噻虫啉对表达多房棘球绦虫nAChR基因HEK293细胞内钙的影响

摘要：

目的 构建多房棘球绦虫nAChR真核表达质粒并在HEK293细胞中表达,探讨噻虫啉(thiacloprid,Thia)对异源表达nAChR-HEK293细胞内游离钙离子的影响,为进一步研究nAChiR基因的结构和功能奠定基础.方法 对多房棘球绦虫nAChR蛋白进行生物信息学分析.扩增nAChR序列全长,构建真核表达质粒pCMV-EGFP-nAChR并转染HEK293细胞.噻虫啉刺激后检测转染细胞内游离钙离子水平及全细胞膜电流.结果 nAChR为四次跨膜蛋白,α螺旋和无规则卷曲是该蛋白的主要组成成分.噻虫啉与nAChR活性位点附近PHE207、PHE 24、ARG 244形成Pi-Pi相互作用,与LEU 60形成盐桥.PCR扩增在接近2 000 bp处观察到明显条带,经过测序证实获得nAChR序列与Wormbase Parasite数据库序列一致.重组质粒pCMV-EGFP-nAChR转染HEK293细胞成功表达nAChR蛋白于细胞膜上.噻虫啉促进nAChR-HEK293细胞内游离钙离子水平增加,并诱发nAChR-HEK293细胞内向型膜电流.结论 噻虫啉促进异源表达nAChR-HEK293细胞胞内游离钙离子水平增加并诱发内向型膜电流.

关键词：nAChR、异源表达、生物信息学分析、钙离子

所属期刊栏目：39

分类号：R383.3(医学寄生虫学)

在线出版日期：2023-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：739-749