布鲁氏菌外膜蛋白OMP10间接ELISA检测方法的建立及免疫原性评估

摘要：

目的 建立布鲁氏菌外膜蛋白OMP10间接ELISA检测方法,评价OMP10在小鼠体内的免疫效果.方法 本研究表达和纯化了布鲁氏菌外膜蛋白OMP10,通过Western Blot进行验证,建立了 OMP10间接ELISA检测方法,然后将OMP10与弗氏佐剂和LDH佐剂配伍成2种亚单位疫苗,免疫小鼠后检测抗体水平、脾脏淋巴细胞的增殖水平、CD4+和CD8+T细胞比值以及细胞因子分泌,最后通过攻毒试验评估OMP10的免疫保护效果.结果 OMP10作为诊断抗原的特异性和符合率均高于70％;免疫小鼠后2种亚单位疫苗均能产生高滴度的IgG抗体,CD4+/CD8+T的比值均高于PBS对照组,IFN-γ高于PBS对照组,差异具有统计学意义(P＜0.01),但IL-4未发生明显变化,表明OMP10能够诱导很好的体液免疫及Th1型免疫应答.免疫保护结果显示,2种亚单位疫苗免疫组小鼠脾脏指数和脾脏载菌量低于布鲁氏菌M5感染组,差异具有统计学意义(P＜0.01),表明OMP10蛋白配伍的亚单位疫苗对布鲁氏菌M5感染小鼠具有高度的保护作用.结论 外膜蛋白OMP10在布鲁氏菌诊断和疫苗方面具有一定的应用价值.

关键词：布鲁氏菌、外膜蛋白OMP10、间接ELISA、抗体水平、细胞因子、免疫保护

所属期刊栏目：39

分类号：R446(诊断学)

资助基金：兵团重大科技项目;国家自然科学基金;河北省重点科技项目

在线出版日期：2023-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：107-114