SFTSV Gn关键氨基酸突变对细胞自噬与病毒增殖的影响

摘要：

目的 探究发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)中Gn蛋白关键氨基酸突变(I323V)对细胞活性以及病毒复制的影响,并通过检测 自噬相关蛋白水平推测其可能机制.方法 利用定点突变和同源重组技术构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-Gn和pcDNA3.1(+)-Gn(I323V).验证其在BSR-T7/5细胞中成功表达后,检测SFTSV Gn对细胞活性、病毒复制和细胞自噬的影响.结果 双酶切鉴定和序列测定证实成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-Gn和pcDNA3.1(+)-Gn(I323V).间接免疫荧光和Western Blot结果表明Gn和Gn(I323 V)成功表达.过表达Gn对病毒复制无明显影响,但表达Gn(I323V)后病毒增殖速率明显降低;Gn和Gn(I323 V)的表达可不同程度降低细胞存活率(P＜0.05),并引起细胞内 自噬相关蛋白LC3 Ⅱ和p62表达增多(P＜0.05).结论 SFTSV Gn可能是通过抑制 自噬流从而影响细胞活性,且第323位氨基酸突变对宿主细胞和病毒复制有明显影响.

关键词：SFTSV、Gn、BSR-T7/5细胞、突变

所属期刊栏目：38

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：山东省传染病预防控制重点实验室开放课题No.2017KEYLAB02

在线出版日期：2023-03-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1080-1086