荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性的价值

摘要：

目的 分析南京市结核分枝杆菌(MTB)感染患者的耐药情况,评价荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌对利福平(RFP)和异烟肼(INH)耐药性的临床价值,探究RFP和INH耐药相关基因突变的特征.方法 对鉴定为MTB的780株菌株同时进行绝对浓度法药物敏感性试验和荧光PCR熔解曲线法检测对RFP和INH的耐药性.以绝对浓度法药物敏感性试验结果为标准,分析熔解曲线法检测RFP和INH的灵敏度、特异度、符合率和一致性(Kappa检验).结果 780株MTB中,22株(2.82％)为RFP单耐药,62株(7.95％)为INH单耐药,143株(18.33％)为耐多药.以绝对浓度法药敏试验结果为标准,荧光PCR熔解曲线法检测MTB对RFP和INH耐药性的灵敏度分别为98.18％和85.85％,特异度分别为95.28％和97.39％,符合率分别为95.90％和94.36％,Kappa值分别为0.88和0.85.RFP分子耐药菌株中全部检测出rpoB基因位点突变,其中以rpoB 529～533位点为最常见的突变(63.87％,122/191),突变位点为rpoB 507～512的20株菌株中只有7株表型耐药,rpoB基因双位点突变的18株菌株全部表型耐药;INH分子耐药菌株中最常见的突变为 katG315位点(66.49％,127/191),其次是inhA启动子区(17.80％.34/191),90％以上的INH分子耐药菌株为表型耐药.结论 南京市结核耐药情况严重,以耐多药结核病为主.荧光PCR熔解曲线法与药敏试验结果高度一致,且弥补了药敏试验对于低度耐药突变株菌检测的局限性.耐药相关基因突变位点的检测有利于结核病的及时诊断和个体化治疗的实施.

关键词：结核分枝杆菌、耐药、基因突变、利福平、异烟肼、熔解曲线法、低度耐药

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分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金No.82002233

在线出版日期：2023-03-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1057-1062