曼氏裂头蚴6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的基因克隆、蛋白表达及转录水平分析

摘要：

目的 分析曼氏迭宫绦虫中6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(Sm6PGDH)的潜在的生物学特征和获得纯化蛋白.方法 通过NCBI和ExPASy网站中在线软件,预测Sm6PGDH基因序列的生物信息学特征.通过PCR技术扩增得到Sm6PGDH的全长序列和构建pET-28a(+)-Sm6PGDH重组质粒,利用双酶切和测序手段鉴定重组质粒.利用western blot鉴定重组蛋白和定量PCR分析在不同浓度葡萄糖培养的裂头蚴体内的转录水平.结果 Sm6PGDH蛋白由491个氨基酸组成,理论相对分子质量约为53.84 kDa.该蛋白分子中无信号肽.Sm6PGDH序列与绦虫、人的同源基因一致性分别为75％和65％以上.Sm6PGDH氨基酸序列中具有39个磷酸化位点、1个O-糖基化位点和9个B细胞线性表位.通过原核蛋白表达,成功得到可溶性的融合蛋白,并且在不同浓度葡萄糖培养的裂头蚴体内Sm6PGDH的转录水平升高.结论 构建了Sm6PGDH重组质粒并获得纯化蛋白,为在裂头蚴的糖代谢的规律研究中提供了物质保障.

关键词：曼氏裂头蚴、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶、生物信息学分析、药物靶标

所属期刊栏目：38

分类号：R383.3(医学寄生虫学)

资助基金：海南省科协青年科技英才学术创新计划项目;国家自然科学基金

在线出版日期：2023-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：963-969