10.3969/j.issn.1002-2694.2022.00.145
Dhori病毒核蛋白抗原表位的筛选及鉴定
目的 研究鉴定DHOV核蛋白(NP)的最小线性B细胞表位(BCEs),为DHOV的疫苗研制和预防奠定基础.方法 本研究针对DHOV-GRT169毒株NP蛋白进行生物信息学分析,采用改良生物合成肽法鉴定其BCEs.首先将DHOV NP蛋白截短为4个片段并鉴定其抗原性,将阳性片段继续截短成相互重叠8个氨基酸的16肽,将16肽序列分别克隆至原核表达载体pXXGST-3中表达,兔抗融合蛋白NP蛋白多克隆抗体作为一抗,用Western blotting检测16肽的抗原性,将检测出的阳性16肽都截短成相互重叠7个氨基酸的8肽,用同样的方法诱导表达及检测.最后用生物信息学方法分析每个BCEs在NP蛋 白三维结构中的位置.结果 从NP蛋白 中最终鉴定出9个BCEs,分别为Enp1(3 NPTPKR8)、Enp2(7KRAEPGD13)、Enp3(83YUFFFL88)、Enp4(111NQTLTDE117)、Enp5(224 QSQKAMLK231)、Enp6(227KAMLKQIF234)、Enp7(418 LNAEFEEY425)、Enp8(421 EFEEYSKL428)、Enp9(432 GTGAFYER439),均位于NP蛋白表面.结论 这些鉴定的表位将提高对DHOV表位分布和致病机制的认识,为DHOV多表位检测抗原的开发提供基础,也可为DHOV感染与免疫机制研究提供理论依据.
蜱传Dhori病毒、核蛋白NP、改良生物合成肽法、最小抗原表位
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R373.3(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金;国家自然科学基金
2023-03-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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