日本血吸虫带电多泡体蛋白5的生物学特性研究

摘要：

目的 克隆、表达 日本血吸虫(Schistosoma japonicum,S.japonicum)带电多泡体蛋白5(CHMP5),并对其生物学特性进行研究.方法 利用PCR扩增S.japonicum CHMP5基因 目的片段,构建重组质粒pET28a(+)-CHMP5,并对该基因进行生物信息学分析.利用荧光定量PCR检测CHMP5在不同时期虫体中的转录水平.对体外表达的重组CHMP5蛋白进行纯化与质谱鉴定,并通过Western blotting检测其反应原性.利用免疫组化实验分析CHMP5在虫体中的分布.以小鼠为动物模型,评估重组CHMP5蛋白抗日本血吸虫病的免疫保护效果.结果 S.japonicum CHMP5的开放阅读框为675 bp,编码224个氨基酸,具有6个B细胞抗原表位;主要定位于S.japonicum虫体的体被上.CHMP5基因在35 d和42 d虫体中的转录水平高于其它检测时期,且42 d雌虫中的转录水平约是42 d雄虫的3倍.克隆表达的重组CHMP5蛋白其理论分子量约为29 kDa,具有较好的反应原性;用其免疫小鼠24 d,即可使小鼠产生较高水平的IgG抗体,并最终诱导产生18.96％的减虫率和42.98％的肝脏减卵率.结论 成功克隆、表达了 S.japonicum体被蛋白CHMP5,其在不同发育时期虫体中均有表达,获得的重组CHMP5蛋白可诱导小鼠产生部分的免疫保护效果,为深入探讨S.japonicum CHMP5的生物学功能提供了基础.

关键词：日本血吸虫、带电多泡体蛋白5、转录水平、组织定位、免疫保护

所属期刊栏目：38

分类号：R383.2+4(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;上海市自然科学基金

在线出版日期：2022-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：764-770