马达里亚加病毒TaqMan RT-PCR检测方法的建立

摘要：

目的 建立马达里亚加病毒(Madariaga virus,MADV)早期且快速的TaqMan反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法.方法 从GenBank中下载MADV基因序列,根据多序列比对结果选择MADV的NSP1基因中的高保守序列片段设计引物与探针,利用体外转录的RNA标准品建立了 MADV的绝对定量分析模型,并进行灵敏度和特异性评价以及重复性验证.结果 该检测方法的灵敏度为1.0×102拷贝/反应,与其它虫媒病毒无交叉反应,重复性检测变异系数均小于1.5％.通过本研究建立的快速检测方法对源自宁夏回族自治区、浙江省和云南省的共计81份不明原因脑炎病例血清标本及161批库蚊标本进行了测定,检测结果均为阴性.结论 成功建立了 MADV TaqMan RT-PCR的快速检测方法,可应用于实验室的早期检测.

关键词：马达里亚加病毒、TaqMan RT-PCR、分子诊断

所属期刊栏目：38

分类号：R373.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：宁夏回族自治区重点研发计划;传染病预防控制国家重点实验室重点项目

在线出版日期：2022-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：428-432