双抗原夹心ELISA法检测登革病毒感染患者血清中的ED Ⅲ抗体

摘要：

目的 建立一种检测登革病毒(dengue virus,DENV)特异性抗体的双抗原夹心ELISA方法.方法 利用毕赤酵母系统表达4个血清型登革病毒包膜蛋白Ⅲ区(envelope protein domain Ⅲ,ED Ⅲ),并采用改良过碘酸钠法对EDⅢ蛋白标记辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP),建立一种可同时检测4个血清型登革病毒ED Ⅲ蛋白特异性抗体的双抗原夹心ELISA法.并对2014年广州珠江医院门诊和住院确诊的登革热患者血清标本进行检测,并与澳洲Panbio MAC ELISA检测的敏感性进行比较.结果 本研究成功建立了一种检测4个血清型登革病毒EDⅢ蛋白特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,该方法能同时检测到4个血清型登革病毒ED Ⅲ蛋白免疫的小鼠血清和Ⅰ型登革病毒EDⅢ蛋白免疫的兔血清,而与烟曲霉AF-MP蛋白免疫的小鼠血清和兔血清均无交叉反应.对184份健康人血清标本检测全为阴性,而对168份确诊为登革病毒感染患者血清标本检测结果表明,两种诊断方法检测结果差异无统计学意义,P＜0.001(57.1％vs 57.7％),联合NS1抗原检测方法,其敏感性提高到97.6％.结论 双抗原夹心ELISA法检测登革病毒ED Ⅲ特异性抗体具有高度的特异性,但如果能同时联合抗原检测可明显提高登革热的早期诊断率.

关键词：登革病毒、双抗原夹心ELISA法、抗体检测、包膜蛋白Ⅲ区

所属期刊栏目：38

分类号：R446.6(诊断学)

资助基金：广东省自然科学基金No.2020A1515011171

在线出版日期：2022-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：317-321