10.3969/j.issn.1002-2694.2021.00.073
4种猪绦虫蚴的多重PCR鉴别
目的 建立一种多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction,mPCR)方法,用于快速鉴别猪囊尾蚴等4种猪的绦虫蚴.方法 比较猪带绦虫(Taenia solium)、亚洲带绦虫(Taenia asiatica)、细粒棘球绦虫(Echinococcusgranulosus)和泡状带绦虫(Taenia hydatigena)的线粒体基因组,选取tRNA-Val、tRNA-Ala、tRNA-Asp和nad1基因作为分子检测靶标,设计4条种特异性上游引物(TaF、EgF、ThF、和TsF)和1条下游通用引物(TR),通过优化反应条件和体系,建立了在一个PCR体系中即可完成对4种猪绦虫蚴的快速鉴别的mPCR方法.结果 4种猪绦虫蚴的特异性PCR引物等比例混合后,在退火温度为50℃的条件下,该mPCR方法可同时扩增出C.cellulosae、T.asiatica、E.granulosus和C.tenuicol-lis的特异性基因片段,其大小分别为478 bp、710 bp、619 bp和542 bp.PCR产物测序后经BLAST比对,与同种虫体的基因序列相似性在99%以上.结论 本研究建立的mPCR方法具有很高的种间特异性,并且可通过扩增片段的大小对4种猪绦虫蚴进行快速、准确的鉴别.
猪;4种绦虫蚴;多重PCR;鉴别诊断
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R383.3;S855.9(医学寄生虫学)
国家重点研发计划项目No.2017FYD0501303.No.2017YFC1601206
2021-08-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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