10.3969/j.issn.1002-2694.2020.00.119
人乳头瘤病毒16型表位嵌合病毒样颗粒的构建及免疫原性研究
目的 制备E749-57表位嵌合病毒样颗粒,并进行免疫原性分析.方法 利用分子模拟软件Discovery Studio预测HPV16 L1的E749-57最佳嵌合位点,将E749-57表位嵌入预测位点.构建pET28a-16L1-E749-57重组质粒,于大肠杆菌中诱导表达HPV16L1-E749-57蛋白并利用镍柱进行亲和层析纯化.于体外重组VLPs后,进行动态光散射粒径和透射电镜分析.用E749-57嵌合VLPs免疫小鼠,假病毒中和试验检测免疫血清中和抗体滴度.流式多因子法检测Th1和Th2型细胞因子水平.结果 HI loop区355/356为最佳表位嵌合位点.正确表达了HPV16 L1-E749-57蛋白并组装E749-57嵌合VLPs.E749-57嵌合VLPs免疫小鼠3次后,小鼠血清中和抗体滴度log10平均值达到4.23,略低于野生型VLPs(log10平均值为4.45).但是,相对于野生型VLPs,E749-57嵌合VLPs诱导产生Th1型细胞因子(INF-γ,IL-2,TNF-α)的水平显著提高.结论 本研究制备的E749-57嵌合VLPs能刺激机体同时产生较强的体液和细胞免疫应答,可能兼具预防和治疗双重功效,为宫颈癌治疗性疫苗的研制奠定基础.
HPV16、嵌合病毒样颗粒、E7蛋白、宫颈癌疫苗、体液和细胞免疫
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R373(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金项目;吉林市创新科技发展计划项目;吉林省大学生创新创业训练计划项目;吉林省抗体工程科技协同创新中心
2020-10-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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