牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿BP亚基单克隆抗体胶体金标记试纸条制备

摘要：

目的 本研究通过优化牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿BP亚单位单克隆抗体的性能,制备胶体金标记检测牛乳腺炎无乳链球菌的试纸条.方法 利用pET30a(+)-BP重组质粒表达蛋白纯化物免疫小鼠,无菌取脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选杂交瘤细胞,制备单克隆抗体,对单克隆抗体进行胶体金标记后制备检测试剂盒,并确定其灵敏度、特异性等技术指标.结果 经数轮筛选,获得1株阳性杂交瘤细胞株,抗体效价达到1∶256 00.胶体金标记试纸条灵敏度量达到106 CFU/mL.特异性测试结果表明,胶体金标记试纸条与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、副结核杆菌、化脓性链球菌培养物人工污染的牛乳样均无阳性反应,只与无乳链球菌乳样出现阳性结果.结论 该胶体金标记免疫层析试纸条,具有实际应用价值,将为牛乳腺炎的筛查检测提供新型、便捷的技术产品.

关键词：无乳链球菌、BP基因、单克隆抗体、胶体金

所属期刊栏目：36

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：内蒙古自治区科技厅社会发展领域计划项目;国家自然科学基金项目;内蒙古自治区乳源性致病菌防控工程技术研究中心开放课题;内蒙古自治区第七批“草原英才”人才工程产业创新团队建设项目

在线出版日期：2020-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：45-49