牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿AP1-AP2-BP基因亚单位抗体的制备

摘要：

目的 构建牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a亚单位重组抗原AP1-AP2-BP,并制备其多亚单位抗体,为后期研制新型免疫疫苗和检测试剂提供实验基础.方法 利用延伸PCR技术构建了AP1-AP2-BP三联基因,并将该串联基因进行转化,诱导,表达,纯化,并将纯化蛋白制作为抗原,对家兔免疫,制备多亚单位抗体,并通过亲和层析的方式从免疫后的血清中获得纯化的IgG,完成多亚单位抗体的制备.结果 AP1-AP2-BP三基因串联重组工程菌株通过诱导、表达,对产物亲和层析等方法获得的纯化蛋白,其相对分子质量为65 kDa,其含量达到3.3 mg/mL,并具有较好的免疫原性.经间接ELISA可知,经过4周的免疫抗体的滴度已达到1∶5 600的水平.通过Protein A280测量数据表明,纯化后的IgG的含量高达9.1mg/mL.结论 牛乳腺炎无乳链球菌的菌毛岛屿AP1-AP2-BP三基因串联重组工程菌经诱导、表达后获得的纯化蛋白APt-AP2-BP多亚单位抗原有较好的免疫原性,为制备相应多亚单位抗体的制备提供了良好的多价抗原,同时为将研制新型工程疫苗及检测试剂提供了科学研究基础.

关键词：无乳链球菌、AP1-AP2-BP、蛋白纯化、亚单位抗体

所属期刊栏目：35

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金项目.31560689、31760725;内蒙古自治区乳源性致病菌防控工程技术研究中心开放课题.MDK2017016、MDK2017018;内蒙古科技厅社会发展领域计划项目食品安全关键技术研究,2017;内蒙古自治区第七批“草原英才”人才工程产业创新团队建设项目2017

在线出版日期：2019-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：206-211