牛分枝杆菌mpb51-mpb70融合基因的原核表达与抗原活性初步鉴定

摘要：

目的 通过获得牛分枝杆菌保护性抗原MPB51、MPB70的融合蛋白MPB51-MPB70,以提高单一蛋白的抗原性.方法 采用重叠拼接PCR技术将牛分枝杆菌mpb51与mpb 70基因融合,获得融合基因mpb51-mpb70,克隆至pMD19中,构建重组质粒pMD-51-70.酶切、纯化后连接至pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET-51-70.通过SDS-PAGE和Westernblotting分析、鉴定融合蛋白的表达及抗原性.以间接ELISA比较MPB51、MPB70、MPB51-MPB70的抗原性.结果 表达、纯化了45 ku的融合蛋白MPB51-MPB70,并与牛结核血清发生特异性反应,且比单一蛋白反应性强.结论 成功地获得了具有良好抗原性的牛分枝杆菌融合蛋白MPB51-MPB70.

关键词：牛分枝杆菌、mpb51基因、mpb70基因、融合蛋白

所属期刊栏目：34

分类号：Q786;S855.2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金31572555;吉林省科技发展计划项目20170101025JC;吉林省教育厅科学技术研究项目201441

在线出版日期：2018-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：805-810