期刊专题

10.3969/j.issn.1002-2694.2017.11.010

猪戊型肝炎病毒SYBR Green Ⅱ荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

引用
目的 建立一种快速检测猪戊型肝炎病毒(HEV)的方法.方法 针对HEVORF2基因保守序列设计1对引物,基于SYBR GreenⅡ染料,建立了检测HEV的实时荧光定量RT-PCR方法.结果 该方法只能对猪戊型肝炎病毒检测到荧光,对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪嵴病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒均不能检测到荧光信号,特异性好;检测HEV时,在4.10×102~4.10×108拷贝/μL内具有良好的线性关系,灵敏度可以达到1.00×102拷贝/μL,扩增相关系数为0.996,扩增产物的熔解温度为84.0℃±0.1℃,该检测方法组内变异系数为0.83%~0.94%,组间变异系数为0.83%~0.94%,重复性较好.利用该方法对临床61份来自四川各地的猪肠内容物进行检测,检出9份阳性,且与常规PCR检测方法的阳性符合率为100%.结论 建立的针对HEV的荧光定量RT-PCR有效可行,对HEV的临床检测和进一步研究奠定了基础.

猪戊型肝炎病毒、SYBR GreenⅡ、荧光定量RT-PCR

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R373.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))

四川省科技支撑计划2014NZ0043;国家“十二五”科技支撑计划No.2015BAD12B04-2.3联合资助 Supported by the Sichuan Province Science and Technology Support Program2014NZ0043;the National Science and Technology Support "The 12th Five-Year" Program2015BAD12B04-2.3

2018-01-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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1002-1006,1017

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中国人兽共患病学报

1002-2694

35-1284/R

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2017,33(11)

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