DOI:10.3969/j.issn.1002-2694.2017.11.010猪戊型肝炎病毒SYBR Green Ⅱ荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用下载全文在线阅读引用分享分享到微信朋友圈打开微信,点击底部的“发现”,使用 “扫一扫” 即可将网页分享到我的朋友圈收藏摘要:目的 建立一种快速检测猪戊型肝炎病毒(HEV)的方法.方法 针对HEVORF2基因保守序列设计1对引物,基于SYBR GreenⅡ染料,建立了检测HEV的实时荧光定量RT-PCR方法.结果 该方法只能对猪戊型肝炎病毒检测到荧光,对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪嵴病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒均不能检测到荧光信号,特异性好;检测HEV时,在4.10×102~4.10×108拷贝/μL内具有良好的线性关系,灵敏度可以达到1.00×102拷贝/μL,扩增相关系数为0.996,扩增产物的熔解温度为84.0℃±0.1℃,该检测方法组内变异系数为0.83%~0.94%,组间变异系数为0.83%~0.94%,重复性较好.利用该方法对临床61份来自四川各地的猪肠内容物进行检测,检出9份阳性,且与常规PCR检测方法的阳性符合率为100%.结论 建立的针对HEV的荧光定量RT-PCR有效可行,对HEV的临床检测和进一步研究奠定了基础.关键词:猪戊型肝炎病毒、SYBR GreenⅡ、荧光定量RT-PCR所属期刊栏目:33分类号:R373.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))资助基金:四川省科技支撑计划2014NZ0043;国家“十二五”科技支撑计划No.2015BAD12B04-2.3联合资助 Supported by the Sichuan Province Science and Technology Support Program2014NZ0043;the National Science and Technology Support "The 12th Five-Year" Program2015BAD12B04-2.3在线出版日期:2018-01-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)页数:共6页页码:1002-1006,1017 英文信息展示收起英文信息